型 號
產(chǎn)品時(shí)間2024-02-07
所屬分類(lèi)人源細胞系
報價(jià)1500
傳代培養操作步驟:
一、貼壁培養
細胞傳代培養操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀(guān)察細胞形態(tài)和生長(cháng)密度,當細胞生長(cháng)密度達到80%~90%時(shí),即可進(jìn)行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養瓶?jì)鹊呐囵B液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據培養瓶大小向瓶?jì)燃尤脒m量含EDTA的,一般應覆蓋整個(gè)培養瓶底。
(4)把培養瓶放入37℃ CO2培養箱進(jìn)行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察,當發(fā)現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時(shí),再輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落,然后立即加入2倍量的培養液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過(guò)度。
(5)吸出所有細胞懸液至離心管內,1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養液重懸細胞,輕輕吹打混勻,使細胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養瓶中,補足培養液,搖勻,放置于37℃ CO2培養箱中進(jìn)行培養。
(8)根據細胞生長(cháng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間,甚至進(jìn)行細胞凍存。
GP2d人結腸癌細胞
細胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | GP2d人結腸癌細胞(STR鑒定正確) | 組織來(lái)源 | 結腸 |
種屬 | 人 | 生長(cháng)特性 | 貼壁生長(cháng) |
細胞代數 | 10代以?xún)?/span> | 細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
支原體檢測 | 無(wú) | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液,液氮儲存 |
細胞詳細介紹:
細胞別稱(chēng) 背景介紹 GP2d has been established from the same adenocarcinoma as GP5d (ECACC catalogue no. 95090715). This has been confirmed by STR profiling at ECACC. The cells were derived from a local recurrence of Duke's grade B, poorly differentiated carcinoma of the colon from a 71 year old female at surgical resection. The patient received no preoperative chemo- or radiotherapy and had a strong family history of colon cancer with two first degree relatives dying of the disease below the age of 55 years. Both clones possess genetic changes consistent with the pattern of tumour progression in colon cancer but are morphologically distinct. An interstitial deletion on chromosome 5 (region 14q to 22q) and an inverted duplication of bands 10q11 and 10q21 has been reported. Both cell lines contain a normal copy of the ki-ras gene and a copy with a transition in codon 12. GP2d cells show growth response to EGF, TGF alpha or insulin with an increase in cell numbers. Amphiregulin mRNA is abundant in GP2d but almost undetectable in GP5d. 生物安全等級 1 細胞規格 1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝 培養基 DMEM+10% FBS+PS 培養條件 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無(wú)血清凍存液,液氮儲 發(fā)貨方式復蘇發(fā)貨(免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞 供應限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說(shuō)明以下細胞培養凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主 |
二、懸浮細胞
傳代培養操作步驟如下:
一般實(shí)驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養液中含有細胞碎片的情況下)。當在顯微鏡下觀(guān)察到懸浮細胞已經(jīng)長(cháng)滿(mǎn)至80%~90%(細胞懸液變黃)時(shí),即可進(jìn)行傳代。
(1)嚴格進(jìn)行無(wú)菌操作,所用一切試劑及耗材均應無(wú)菌,且須在無(wú)菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細胞發(fā)生污染。
(2)所用培養液必須適宜細胞生存和生長(cháng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細胞,對培養液的要求不一樣,必要時(shí)可用預實(shí)驗的方法選擇適當的培養液。
(3)胎牛血清對于維持細胞生存,促進(jìn)細胞生長(cháng)起著(zhù)關(guān)鍵作用??筛鶕墨I或預實(shí)驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應保持用至實(shí)驗完成。
(4)消化細胞時(shí)應避免消化時(shí)間過(guò)短導致消化不收集到的細胞數量少,或消化時(shí)間過(guò)長(cháng)導致細胞成團塊樣絮狀游離,這時(shí)的細胞已有損傷或死亡,影響細胞數量和實(shí)驗進(jìn)度。
(5)細胞離心的時(shí)候應避免離心力過(guò)小收集的細胞數量不夠,或離心力過(guò)大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后,應先彈散細胞沉淀,再加入培養液重懸,這樣比直接吹打對細胞損傷小,可以提高細胞活率。
(6)吹打細胞時(shí)應盡量避免細胞的產(chǎn)生,以免損傷細胞,影響細胞狀態(tài)(吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產(chǎn)生)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
組織結構型內皮細胞一氧化氮合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量檢測試劑盒
植物組織可溶性胞漿蛋白粗提制備試劑盒
通用型CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒
CASPASE-8蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
B6比色法定量檢測試劑盒
TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP
細胞EPHA1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
冰凍切片組織衰老晚期特異性脂褐素高碘酸希爾(PAS)法
醫學(xué)蛋白分析試劑專(zhuān)題
組織花生四烯酸(arachidonic acid)酶反應比色法定量檢測試劑盒
精漿蛋白(semen plasma protein)萃取試劑盒
細胞色素P450亞酶CYP3A1(BROD)活性熒光定量檢測試劑盒
細胞線(xiàn)粒體復合物V蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒
組織血管緊張素Ⅰ轉化酶1(ACE1)活性熒光共振能量轉移法(FRET)定量檢測試劑盒
胰島素細胞脂肪誘導生成比色法定量檢測試劑盒
原纖維蛋白樣蛋白DHRD抗體
鈣介質(zhì)素重組兔單克隆抗體
親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIA抗體
IP3KC蛋白抗體
細胞毒性受體NK-p44抗體
WD重復蛋白16抗體
枯草桿菌蛋白酶同工酶1抗體
APC標記人CD161單克隆抗體
GP2d人結腸癌細胞鋅指蛋白696抗體
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