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產(chǎn)品中心/PRODUCTS

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總抗氧化能力(DPPH法)生化檢測試劑盒

型 號

產(chǎn)品時(shí)間2023-11-06

所屬分類(lèi)氧化與抗氧化系列

報價(jià)300

產(chǎn)品描述:總抗氧化能力(DPPH法)生化檢測試劑盒測定對象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。

產(chǎn)品概述

商品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng):總抗氧化能力(DPPH法)生化檢測試劑盒

規格:100/96 50/48 

貨號 : EY-01S165

測試方法:微量法 可見(jiàn)分光光度法  

分類(lèi):氧化與抗氧化系列

商品詳情:

研究意義:

測定對象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。

測定原理:

DPPH·為穩定的自由基 ,溶于甲醇,乙醇等極性溶劑中,在515nm處有大吸收。向 DPPH·溶液中加入抗氧化劑時(shí),會(huì )發(fā)生脫色反應,因此可用吸光度的變化并以Trolox作為對照體系量化抗氧化物質(zhì)的抗氧化能力。

自備實(shí)驗用品:

恒溫水浴鍋、低溫離心機、酶標儀、96孔板和蒸餾水。

粗酶液提?。?/p>

1、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。

2、細菌、真菌:按照細胞數量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。

3、血清等液體:直接測定。


5.png



ADH測定操作:

1. 分光光度計預熱30 min,調節波長(cháng)到340 nm,蒸餾水調零。

2. 試劑三在25℃水浴中保溫30 min。

3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液、800μL試劑三和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽測定管=A1-A2。

測定步驟:

1、分光光度計預熱30min以上,調節波長(cháng)至340nm,蒸餾水調零。

2、將試劑二在37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)水浴10min以上。

3、操作表:

試劑名稱(chēng)μL

測定孔

樣本

20

試劑二

760

試劑三

10

試劑四

10


將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,混勻后立即在340 nm波長(cháng)下記錄初始吸光度A1和反應1min后的吸光度A2,計算ΔA=A1-A2。

注意:若A1-A2大于0.5,需將樣本用提取液稀釋?zhuān)笰1-A2小于0.5,可提高檢測靈敏度。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

NAD-MDH活力單位的計算:

1、血清(漿)NAD-MDH活力的計算

單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=6430×ΔA

2、組織、細菌或細胞中NAD-MDH活力的計算:

(1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T =6430×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總)÷T=3.215×ΔA

V反總:反應體系總體積,8×10-4 L;ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時(shí)間,1 min;W:樣本質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;2000:細胞或細菌總數,2000萬(wàn)。

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