型 號
產(chǎn)品時(shí)間2023-11-06
所屬分類(lèi)糖代謝系列
報價(jià)300
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 | 貨號 |
半纖維素含量生化檢測試劑盒 | 100管/96樣 50管/48樣 | EY-01S1257 |
測定意義
半纖維素是植物細胞壁中與纖維素緊密結合的多糖混合物,是構成細胞初生壁的主要成分,廣泛存在于植物中,是一種新型可利用能源。
測定原理
半纖維素經(jīng)酸處理后轉化成還原糖,與DNS生成紅棕色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰,吸光值大反映了半纖維素含量。
需自備的儀器和用品、
天平、40目篩,恒溫水浴鍋、烘箱、可見(jiàn)分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板
試劑一:液體×1瓶,室溫保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現配現用。
試劑四:液體×1支,4℃保存。
1、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。
2、細菌、真菌:按照細胞數量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。
3、血清等液體:直接測定。
(1)按照蛋白濃度計算
活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。
ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T
=1608×△÷Cpr
(2)按照樣本質(zhì)量計算
活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。
ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A÷W
(3)按細胞數量計算
活性單位定義:25℃中每104個(gè)細胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。
ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A ÷細胞數量
(4)按液體體積計算
活性單位定義:25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。
ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T
=1608×△A
ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V反總:反應體系總體積,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;V樣:加入反應體系中上清液體積,100μL=0.1 mL;T:反應時(shí)間,1min。
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