人血管平滑肌細胞是構成血管壁組織結構及維持血管張力的主要細胞成分，其結構及功能。的改變可導致細小動(dòng)脈硬化甚至高血壓的發(fā)生發(fā)展。高血壓病是一種以細胞增殖。為主要病變的疾病。高血壓病時(shí)血管結構的改變主要表現在細胞肥大、增殖及結。締組織含量增加，中小動(dòng)脈壁肥厚。
人血管平滑肌細胞的培養步驟：
1）復蘇細胞：將細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜，培養過(guò)夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
人血管平滑肌細胞的實(shí)驗方法：
1、分離與培養：麻醉后取胸主動(dòng)脈及腹主動(dòng)脈，將血管組織剪成小塊培養于含有10%血清的DMEM低糖培養基中。待細胞生長(cháng)至融合后采用胰酶消化傳代，采用細胞進(jìn)行實(shí)驗。
2、增殖實(shí)驗：將細胞接種至96孔板，待細胞貼壁后換用無(wú)血清的DMEM低糖培養基饑餓24h。采用細胞計數試劑盒測定的吸光度值，以各組吸光度值與初始吸光度的比值作為各組的相對細胞活力，并以此繪制細胞增殖曲線(xiàn)。
3、劃痕實(shí)驗：將細胞接種于12孔板，待細胞生長(cháng)融合時(shí)換用無(wú)血清DMEM低糖培養基饑餓24h，采用無(wú)菌吸頭劃痕并采用PBS沖洗2次。換用條件培養基孵育24h，并拍照觀(guān)察。每組隨機取5個(gè)視野，計數遷移細胞的數目，以此判斷細胞的遷移活性。
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