小鼠抗人kappa雜交瘤細胞;mAbhIgκ-488細抱凍存方案:
以下實(shí)驗方案介紹了培養細抱胞六存的一般流程。詳細的實(shí)驗方案,必須參閱針對具依細胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
1.配制」存培養基,于2C至8°C下儲存,夏至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于用細系。
2凍存貼壁細抱胞,利用傳代時(shí)所月方法輕柔地使細胞從廷織培養容器上脫離下來(lái)。用該細抱所需*培養基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍染法或普使用 Countess(⑤自動(dòng)細計數儀測定總細態(tài)數和活細百分比。根據所需活細
4.以大約100-200X9的離心力將細胞暴液楽心5至10分鐘。在無(wú)條件下小心鑰持掉上清液,不要攪動(dòng)細抱胞沉定。
注:心速度和時(shí)?取決于細種類(lèi)
5.月預冷的凍存培養基重新暴浮細胞沉,將其調至該細抱適會(huì )的活細胞密度。凍細胞,使涅度每分鐘大約降低1C?;蛘?將裝有細胞的凍存管放入凍存倉中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
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