技術(shù)文章/ARTICLES

磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體的生物素化標記實(shí)驗要點(diǎn)：
1.如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì )抑制標記反應。因此,蛋白質(zhì)在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì )有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個(gè)不同的分子比來(lái)篩選最適條件；
3.用NHSB量過(guò)量也是不利的,抗原的結合位點(diǎn)可能因此被封閉,導致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當游離ε-氨基(賴(lài)氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì )降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性；
6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結合；
7.交聯(lián)反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會(huì )對生物素化抗體與親和素的結合產(chǎn)生競爭作用；
8.在細胞的熒光標記實(shí)驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。

 沙丁胺醇單克隆抗體
HRP標記沙丁胺醇單克隆抗體
沙丁胺醇多克隆抗體
(2NP-AOZ)呋喃唑酮代謝物單克隆抗體
(2NP-AMOZ)呋喃它酮代謝物單克隆抗體
(2NP-SEM)呋喃西林酮代謝物單克隆抗體
(2NP-AHD)呋喃妥因代謝物單克隆抗體
孔雀石綠單克隆抗體
氯霉素單克隆抗體
氟喹諾酮類(lèi)藥單克隆抗體
恩諾沙星單克隆抗體
環(huán)丙沙星單克隆抗體
沙拉沙星單克隆抗體
氟甲喹單克隆抗體
磺胺類(lèi)藥物單克隆抗體
磺胺嘧啶單克隆抗體
磺胺二甲基嘧啶單克隆抗體
磺胺二甲氧嘧啶單克隆抗體
磺胺喹噁啉單克隆抗體
磺胺對甲氧嘧啶單克隆抗體