白介素試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗人IL-6抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經(jīng)過(guò)孵育,樣本中存在的IL-6與固相抗體和檢測抗體結合,形成免疫復合物。洗滌去除未結合的物質(zhì)后,加入辣根過(guò)氧化物酶標記的鏈霉親和素。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應,在450nm波長(cháng)測定吸光度值。
白介素試劑盒的使用注意事項:
檢試劑盒標簽上的有效期。如果超過(guò)有效期,請勿使用;
按說(shuō)明書(shū)確定所有試劑齊全(數量、體積);
標本制督要規范,每份標本體積要按2-3個(gè)復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備分。短期內無(wú)法實(shí)驗者,注意低溫保存;
好所有實(shí)驗額外所需物品,(比如移液器,試管,清洗器,酶標儀);
安說(shuō)明書(shū)將所用試劑平億至室溫,根據檢測標本數量確定所需試劑的量;
檢試劑盒內每種試劑的貯存條件,保證所有試剤均按照試劑盒內說(shuō)明書(shū)推薦的條件存儲;
檢不穩定或旾變質(zhì)的試劑溶液(比如沉淀或變色)。有些試剤,比如標準品稀釋液或者檢汎稀釋液,可能在設計時(shí)就含有沉淀物。
所有試劑在滴入酶標板之前,需充分;
而由于沉淀物的特性,在加入酶標板之前,需不??拱?;
切勿使用不同批號的試剤取代現有試剤或泥合現有試劑;
在泥合或溶解蛋白溶液時(shí),遊泡沫產(chǎn)生;
在實(shí)驗開(kāi)始之前,安排好實(shí)驗流程;
在實(shí)驗開(kāi)始之前,清潔工作臺。