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    傘枝梨頭霉PCR試劑盒的設計引物應遵循哪些原則

    點(diǎn)擊次數:856  更新時(shí)間:2020-11-25
       傘枝梨頭霉PCR試劑盒可用于檢測食品或其他材料中是否有的成分?,F代食品加工工藝改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質(zhì)地等特性,因此傳統的感官鑒別技術(shù)已經(jīng)無(wú)法對食材的真偽進(jìn)行準確的鑒定。同時(shí)部分食材還有致敏性,因此基于基因檢測的快速靈敏的食材來(lái)源檢測技術(shù)將對食品監管和安全提供重要的保障。
     
      特點(diǎn):
      1.即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供病毒DNA模板。
      2.引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,靈敏性比使用世界動(dòng)物衛生組織推薦的引物高100倍以上。
      3.特異性高,引物是根據保守的vp72基因設計。
      4..提供陽(yáng)性對照,便于分析實(shí)驗結果。
      5.PCRmix中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。本試劑盒足夠做40μL體系的PCR50次,只能用于科研。
     
      傘枝梨頭霉PCR試劑盒設計引物應遵循以下原則:
     ?、僖镩L(cháng)度:15-30bp,常用為20bp左右。
     ?、谝飻U增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長(cháng)至10kb的片段。
     ?、垡飰A基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過(guò)多易出現非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
     ?、鼙苊庖飪炔砍霈F二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會(huì )形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
     ?、菀?’端的堿基,特別是倒數第二個(gè)堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
     ?、抟镏杏谢蚰芗由虾线m的酶切位點(diǎn),被擴增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn),這對酶切分析或分子很有好處。
     ?、咭锏奶禺愋裕阂飸c核酸序列數據庫的其它序列無(wú)明顯同源性。
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