原代細胞是剛從體內取出的組織中獲得的細胞，要求不嚴格的話(huà)，十代以?xún)榷妓阍毎?。因為離體不久，所以其對外界的刺激的反應更接近體內的實(shí)際情況，這也是為什么藥篩要用原代細胞，或者起碼要有原代細胞的驗證。
凍存的原代細胞該如何開(kāi)始培養？
(1) 將一管細胞從液氮罐中取出，注意保護手和眼睛。
(2) 將凍存管快速的放入37℃水浴中，輕輕握住并旋轉，直到管內物體*融化。
(3) 將凍存管立即從水浴中拿出，擦干，轉入無(wú)菌環(huán)境。
(4) 用70％的酒精沖洗凍存管，然后擦去多余酒精。
(5) 打開(kāi)蓋子，注意手指不要碰到里面的螺紋（注意，由于凍存管有負壓，開(kāi)蓋時(shí)可能會(huì )有少量溢出，這是正?，F象）。
(6) 用多聚賴(lài)氨酸包被培養瓶。多數細胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個(gè)細胞。
(7) 蓋好培養瓶的蓋子，輕輕搖晃培養瓶以使細胞分布均勻。若需要氣體交換可打開(kāi)蓋子。
(8) 將培養瓶放入培養箱中。
(9) 放入培養箱后第6-16小時(shí)更換一次培養基，以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細胞。
原代細胞的組織塊培養法：
1）組織塊接種后的前3天，在觀(guān)察和移動(dòng)的過(guò)程中，注意不要引起液體的振蕩。要避免經(jīng)常翻動(dòng)和振動(dòng)，否則組織塊不易附著(zhù)于瓶壁上或附著(zhù)后也會(huì )脫落飄起。
2）加入的培養液不宜過(guò)多，避免浸泡的組織塊受輕微的波動(dòng)而脫落下來(lái)。
3）當細胞向外遷徙出來(lái)后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細胞，它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會(huì )影響原代細胞的生長(cháng)。
4）為促進(jìn)組織塊盡快粘貼在培養瓶皿上，可以在種植前先將膠原薄層涂在培養瓶底壁上。
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