型 號
產(chǎn)品時(shí)間2024-02-26
所屬分類(lèi)兔原代細胞
報價(jià)2600
收貨處理取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態(tài)
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養
傳代代數可傳5代左右;3代以?xún)葼顟B(tài)最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動(dòng)培養瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀(guān)察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4.待細胞貼壁后,培養觀(guān)察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養基。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 兔組織DC細胞 | 貨號 | EY-XY3785 |
英文名稱(chēng) | rabbit tissues DCcells | 規格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
細胞鑒定:經(jīng)鑒定細胞純度高于90%
支原體檢測:兔組織DC細胞不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
產(chǎn)品規格:5×105cells/T25或1mL凍存管
培養基:兔組織DC細胞專(zhuān)用培養基
培養條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件:無(wú)血清凍存液,液氮儲存
細胞代數:第1代
產(chǎn)品貨期現貨,1周左右
運輸方式T25培養瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用
樹(shù)突狀細胞(Dendritic cells, DC)是機體功能強的專(zhuān)職抗原遞呈細胞,它能高效地攝取、加工處理和遞呈抗原,未成熟DC具有較強的遷移能力,成熟DC能有效激活初始型T細胞,處于啟動(dòng)、調控、并維持免疫應答的中心環(huán)節。DC的來(lái)源有兩條途徑:①髓樣干細胞在GM-CSF的刺激下分化為DC,稱(chēng)為髓樣DC,也稱(chēng)DCl,與單核細胞和粒細胞有共同的前體細胞;包括朗格漢斯細胞,間皮(或真皮)DCs以及單核細胞衍生的DCs等,②來(lái)源于淋巴樣干細胞,稱(chēng)為淋巴樣DC或漿細胞樣DC,即DC2,與T細胞和和臍帶血DC細胞 |
1.準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線(xiàn)消毒20分鐘。開(kāi)始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:點(diǎn)燃酒精燈,安裝吸管帽。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動(dòng)一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離:在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí),可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀(guān)察,如組織已分散成細胞團或單個(gè)細胞,立即終止消化,隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開(kāi)的組織塊。低速(500~1000轉/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養液。
7.計數:用計數板計數,如細胞懸液細胞密度過(guò)大,再補加培養液調整后,分裝入培養瓶中。對大多數細胞來(lái)說(shuō),pH要求在7.2~7.4范圍,培養液呈微紅色,如顏色偏黃,說(shuō)明液體變酸,可用NaHCO3調整。
8.培養:置于36.5℃溫箱培養,如用CO2溫箱培養,瓶蓋需擰松半圈。
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