型 號
產(chǎn)品時(shí)間2024-02-18
所屬分類(lèi)其它細胞系
報價(jià)1500
PK-13豬腎細胞系
細胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | PK-13豬腎細胞系 | 組織來(lái)源 | 腎 |
種屬 | 豬 | 生長(cháng)特性 | 貼壁生長(cháng) |
細胞代數 | 10代以?xún)?/span> | 細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
凍存條件 | 無(wú)血清凍存液,液氮儲存 |
細胞詳細介紹:
細胞別稱(chēng) PK-13;豬腎細胞系 細胞規格;1x106cells/T25或1mL凍存管 支原體檢測;無(wú) 培養基;DMEM+10%FBS+1%雙抗 培養條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無(wú)血清凍存液,液氮儲 發(fā)貨方式復蘇發(fā)貨(免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞 供應限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說(shuō)明以下細胞培養凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主 |
二、懸浮細胞
傳代培養操作步驟如下:
一般實(shí)驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養液中含有細胞碎片的情況下)。當在顯微鏡下觀(guān)察到懸浮細胞已經(jīng)長(cháng)滿(mǎn)至80%~90%(細胞懸液變黃)時(shí),即可進(jìn)行傳代。
(1)嚴格進(jìn)行無(wú)菌操作,所用一切試劑及耗材均應無(wú)菌,且須在無(wú)菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細胞發(fā)生污染。
(2)所用培養液必須適宜細胞生存和生長(cháng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細胞,對培養液的要求不一樣,必要時(shí)可用預實(shí)驗的方法選擇適當的培養液。
(3)胎牛血清對于維持細胞生存,促進(jìn)細胞生長(cháng)起著(zhù)關(guān)鍵作用??筛鶕墨I或預實(shí)驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應保持用至實(shí)驗完成。
(4)消化細胞時(shí)應避免消化時(shí)間過(guò)短導致消化不收集到的細胞數量少,或消化時(shí)間過(guò)長(cháng)導致細胞成團塊樣絮狀游離,這時(shí)的細胞已有損傷或死亡,影響細胞數量和實(shí)驗進(jìn)度。
(5)細胞離心的時(shí)候應避免離心力過(guò)小收集的細胞數量不夠,或離心力過(guò)大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后,應先彈散細胞沉淀,再加入培養液重懸,這樣比直接吹打對細胞損傷小,可以提高細胞活率。
(6)吹打細胞時(shí)應盡量避免細胞的產(chǎn)生,以免損傷細胞,影響細胞狀態(tài)(吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產(chǎn)生)。
傳代培養操作步驟:
一、貼壁培養
細胞傳代培養操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀(guān)察細胞形態(tài)和生長(cháng)密度,當細胞生長(cháng)密度達到80%~90%時(shí),即可進(jìn)行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養瓶?jì)鹊呐囵B液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據培養瓶大小向瓶?jì)燃尤脒m量含EDTA的,一般應覆蓋整個(gè)培養瓶底。
(4)把培養瓶放入37℃ CO2培養箱進(jìn)行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察,當發(fā)現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時(shí),再輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落,然后立即加入2倍量的培養液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過(guò)度。
(5)吸出所有細胞懸液至離心管內,1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養液重懸細胞,輕輕吹打混勻,使細胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養瓶中,補足培養液,搖勻,放置于37℃ CO2培養箱中進(jìn)行培養。
(8)根據細胞生長(cháng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間,甚至進(jìn)行細胞凍存。
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