原代細胞是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個(gè)細胞并在體外進(jìn)行培養的細胞。這里的組織主要指：組織器官、外周血及胚胎等。由于原代細胞生長(cháng)緩慢，繁殖一定的代數停止生長(cháng)。所以一般認為：培養的原代的1代和傳代到10代以?xún)鹊募毎y稱(chēng)為原代細胞培養。
原代細胞的提取的整個(gè)操作過(guò)程：
1)整個(gè)操作要在潔凈通風(fēng)的超凈臺下進(jìn)行，所有的器材要高壓消毒。
2)根據BALB/c小鼠的體重，用10ml/kg3%濃度的麻醉；將小鼠置于盛有75%乙醇的燒杯內，這一步不僅可以消毒，也可以讓小鼠體毛浸濕，后續剃去皮毛的時(shí)候不會(huì )沾到剪刀或組織上。
3)用鑷子輕輕挑起小鼠的心臟，裝有PBS的注射器插入心尖，同時(shí)在右心耳處剪開(kāi)一個(gè)小口，緩慢推動(dòng)注射器，隨著(zhù)心臟的跳動(dòng)，將體內的血液沖洗出來(lái)。
4)取出小鼠的肺部組織，將肺組織切成小米粒樣的大小，置于預冷的HBSS中反復沖洗幾次。
5)將小米粒大小的肺組織置于培養瓶中（培養瓶前一天用1%明膠溶液包被培養面，4度過(guò)夜，小鼠處理前，將培養瓶放置培養箱中，使其溫度恢復至37度），置于培養箱37度的環(huán)境下，消化4個(gè)小時(shí)。
6)消化4小時(shí)后，加入RPMI1640培養基（有10%血清、1%雙抗、1%內皮細胞生長(cháng)因子）10ml（*添加培養基，可以是正常培養時(shí)的2倍量），繼續培養24小時(shí)（繼續培養的時(shí)間可根據細胞貼壁情況適當調整）。
7)24小時(shí)后，取出肺組織，鏡下觀(guān)察細胞狀態(tài)，換液。
8)原代細胞的提取和培養是很慢的過(guò)程，一般需等到24小時(shí)后，才能在鏡下看到些許細胞群，一周到兩周后才會(huì )看到鵝卵石樣的排列情況。
9)原代細胞2-3天換液一次，因為內皮細胞生長(cháng)形成單層時(shí)，會(huì )出現接觸抑制現象。所以，內皮細胞生長(cháng)接近單層時(shí)就可以傳代了，不要等到長(cháng)得非常滿(mǎn)。
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