型 號
產(chǎn)品時間2024-02-29
所屬分類其它類原代細(xì)胞
報(bào)價2600
原代細(xì)胞的分離培養(yǎng)：
原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官，讓它們在體外維持與生長。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開機(jī)體，它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變，在一定程度上可反映它們在體內(nèi)的狀態(tài)，表現(xiàn)出來源組織或細(xì)胞的特性， 因此用于藥物實(shí)驗(yàn)，尤其是藥物對細(xì)胞活動、結(jié)構(gòu)、代謝、有無毒性或殺傷作用等，是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
（一）組織塊培養(yǎng)法
許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng)，因?yàn)榉椒ê唵?，?xì)胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌，有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后， 即可進(jìn)行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺／無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
（1） 在無菌條件下，取待培養(yǎng)的組織適量，置入小燒杯中， 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次，去掉組織塊表面的血污。
（2）用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
（3）再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗， 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉，將燒杯傾斜，用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
（4）用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml）的培養(yǎng)液再清洗，用吸管吸干后加入5ml 含20％血清的培養(yǎng)液。
（5）用彎頭吸管吸取組織小塊，均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面，吸去多余的培養(yǎng)液，各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋，做好標(biāo)記， 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
（6） 2~4h 后，于超凈工作臺中，緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20％血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml ）的培養(yǎng)液少量，以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
（7）輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱， 如無特殊情況，不必觀察。1~2 周后，可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長出，形成生長暈。
（9） 一般說來，若培養(yǎng)液無明顯改變， 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長滿整個培養(yǎng)皿內(nèi)表面，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
豬骨髓中性粒細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性：
產(chǎn)品名稱 | 豬骨髓中性粒細(xì)胞 | 組織來源 | 骨髓 |
種屬 | 豬 | 生長特性 | 懸浮生長 |
分離方法 | 通過密度梯度離心法獲得 | 英文名稱 | pig bone marrow neutrophil |
貨號 | EY-XY4137 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
細(xì)胞鑒定：CD11b/Integrin alpha M+、CD15+、CD45+或CD18+免疫熒光染色為陽性，細(xì)胞純度高于90%
支原體檢測：豬骨髓中性粒細(xì)胞不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基：豬骨髓中性粒細(xì)胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存
細(xì)胞代數(shù)：第1代
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨，1周左右
運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹：
中性粒細(xì)胞(neutrophil)是在瑞氏(Wright)染色血涂片中，胞質(zhì)呈無色或極淺的淡紅色，有許多彌散分布的細(xì)小的(0.2~0.4微米)淺紅或淺紫色的顆粒。細(xì)胞核呈桿狀或2~5分葉狀，葉與葉間有細(xì)絲相連。中性粒細(xì)胞具趨化作用、吞噬作用和殺菌作用。中性粒細(xì)胞來源于骨髓，具有分葉形或桿狀的核，胞漿內(nèi)含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細(xì)顆粒。這些顆粒多是溶酶體，內(nèi)含髓過氧化酶、、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類，與細(xì)胞的吞噬和消化功能有關(guān)。 |
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat glucocoicoid receptor alpha (GR- alpha) ELISA Kit 大鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒
Humahyroxine,T4ELISAKit 人甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumancoagulationfactorⅢ,FⅢELISA試劑盒人Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
組蛋白脫乙酰化酶6(HDAC6)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Humaetinoicacidinduciblegene/RIG-likereceptor,RLR-9ELISAKit人誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體(RLR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat monocyte chemotactic protein 4 (MCP-4/CCL13) ELISA Kit 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒
HumanGasicMucin,GMELISAKit 人胃粘液素(GM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor2,3-DPG(Human2,3-Disphosphoglycerate,2)ELISAKit人2,3-二0酸甘油酸規(guī)格：48T/96T
飲料環(huán)(cyclamate)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒20次
Mouselipoproteinα,Lp-αELISAKit小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
豬骨髓中性粒細(xì)胞小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
操作方法：
組織塊直接培養(yǎng)法（原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)）
材料與儀器
【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎，10－13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞，成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺中有以下物品：1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS)1瓶；100ml 0.25%瓶；PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個；3、50ml離心筒2個4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個5、1ml，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊；7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；8、酒精燈1臺；
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1－2個胚胎轉(zhuǎn)移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中，用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎，用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下，將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25％的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降，將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中，該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中，重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液，1200r/rain，5分鐘，棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞，按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。
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