型 號
產(chǎn)品時間2024-02-22
所屬分類小鼠原代細(xì)胞
報價2600
小鼠臟器組織白細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性：
產(chǎn)品名稱 | 小鼠臟器組織白細(xì)胞 | 組織來源 | 小鼠臟器組織 |
種屬 | 小鼠 | 生長特性 | 細(xì)胞為混合體系，大部分懸浮生長，小量貼壁生長 |
分離方法 | 通過密度梯度離心法獲得 | 英文名稱 | mouse organ tissues leukocyte |
貨號 | EY-XY3600 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
細(xì)胞鑒定：血涂片，Giemsa染色驗證
支原體檢測：小鼠臟器組織白細(xì)胞不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基：小鼠臟器組織白細(xì)胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存
細(xì)胞代數(shù)：第1代
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨，1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹：
白細(xì)胞(英文名:leukocyte，white blood cell，簡稱:WBC)，舊稱白血球。血液中的一類細(xì)胞。白細(xì)胞經(jīng)復(fù)合染料染色后，可根據(jù)其形態(tài)差異和細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有無的顆?？煞至＜?xì)胞和無粒細(xì)胞。無粒細(xì)胞又分為單核細(xì)胞與淋巴細(xì)胞兩種。血液中有三種類型的淋巴細(xì)胞：B細(xì)胞、T細(xì)胞和NK細(xì)胞。粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有嗜色顆粒，分為中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞。在顯微鏡下可以看到，血細(xì)胞中體積比較大、數(shù)量比較少。具有細(xì)胞核。白細(xì)胞能吞噬異物產(chǎn)生抗體， |
原代細(xì)胞的分離培養(yǎng)：
原代培養(yǎng)即直接從有機體取下細(xì)胞、組織或器官，讓它們在體外維持與生長。原代培養(yǎng)的特點是細(xì)胞或組織剛離開機體，它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變，在一定程度上可反映它們在體內(nèi)的狀態(tài)，表現(xiàn)出來源組織或細(xì)胞的特性， 因此用于藥物實驗，尤其是藥物對細(xì)胞活動、結(jié)構(gòu)、代謝、有無毒性或殺傷作用等，是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
（一）組織塊培養(yǎng)法
許多實驗室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進行原代培養(yǎng)，因為方法簡單，細(xì)胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌，有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后， 即可進行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺／無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
（1） 在無菌條件下，取待培養(yǎng)的組織適量，置入小燒杯中， 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次，去掉組織塊表面的血污。
（2）用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
（3）再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗， 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉，將燒杯傾斜，用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
（4）用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml）的培養(yǎng)液再清洗，用吸管吸干后加入5ml 含20％血清的培養(yǎng)液。
（5）用彎頭吸管吸取組織小塊，均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面，吸去多余的培養(yǎng)液，各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋，做好標(biāo)記， 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
（6） 2~4h 后，于超凈工作臺中，緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20％血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml ）的培養(yǎng)液少量，以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
（7）輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱， 如無特殊情況，不必觀察。1~2 周后，可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長出，形成生長暈。
（9） 一般說來，若培養(yǎng)液無明顯改變， 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長滿整個培養(yǎng)皿內(nèi)表面，即可進行傳代培養(yǎng)。
操作方法：
組織塊直接培養(yǎng)法（原代細(xì)胞培養(yǎng)實驗）
材料與儀器
【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎，10－13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞，成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品：1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS)1瓶；100ml 0.25%瓶；PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個；3、50ml離心筒2個4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個5、1ml，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個6、細(xì)胞計數(shù)板1塊；7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；8、酒精燈1臺；
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1－2個胚胎轉(zhuǎn)移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中，用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎，用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下，將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25％的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降，將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中，該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中，重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液，1200r/rain，5分鐘，棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞，按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。
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