質(zhì)量檢測：廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽(yáng)性，純度高于 90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等

產(chǎn)品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管

培養基：大鼠肝外膽管上皮細胞培養基

培養條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：0.25%

 產(chǎn)品貨期現貨，1周左右

運輸方式T25培養瓶/ 順豐快遞（包郵）

供應限制僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用

收貨處理取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態(tài)

傳代密度細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養

傳代代數可傳5代左右；3代以?xún)葼顟B(tài)最佳

傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿

傳代方法

1.吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動(dòng)培養瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀(guān)察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；

4.待細胞貼壁后，培養觀(guān)察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養基。

1.準備：取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面，紫外線(xiàn)消毒20分鐘。開(kāi)始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2.布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3.處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。

4.剪切：用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊，以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液，然后一并倒入三角燒瓶中，結扎瓶口或塞以膠塞。

5.消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6.分離：在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀(guān)察，如組織已分散成細胞團或單個(gè)細胞，立即終止消化，隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開(kāi)的組織塊。低速（500~1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養液。

7.計數：用計數板計數，如細胞懸液細胞密度過(guò)大，再補加培養液調整后，分裝入培養瓶中。對大多數細胞來(lái)說(shuō)，pH要求在7.2~7.4范圍，培養液呈微紅色，如顏色偏黃，說(shuō)明液體變酸，可用NaHCO3調整。

8.培養：置于36.5℃溫箱培養，如用CO2溫箱培養，瓶蓋需擰松半圈。

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