傳代培養操作步驟：

一、貼壁培養

細胞傳代培養操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀(guān)察細胞形態(tài)和生長(cháng)密度，當細胞生長(cháng)密度達到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養瓶?jì)鹊呐囵B液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據培養瓶大小向瓶?jì)燃尤脒m量含EDTA的，一般應覆蓋整個(gè)培養瓶底。

（4）把培養瓶放入37℃ CO2培養箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察，當發(fā)現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養瓶中，補足培養液，搖勻，放置于37℃ CO2培養箱中進(jìn)行培養。

（8）根據細胞生長(cháng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細胞凍存。

小鼠附睪脂肪干細胞（永生化）

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養操作步驟如下：

一般實(shí)驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀(guān)察到懸浮細胞已經(jīng)長(cháng)滿(mǎn)至80%~90%（細胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養液必須適宜細胞生存和生長(cháng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細胞，對培養液的要求不一樣，必要時(shí)可用預實(shí)驗的方法選擇適當的培養液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進(jìn)細胞生長(cháng)起著(zhù)關(guān)鍵作用?？筛鶕墨I或預實(shí)驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實(shí)驗完成。

（4）消化細胞時(shí)應避免消化時(shí)間過(guò)短導致消化不收集到的細胞數量少，或消化時(shí)間過(guò)長(cháng)導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時(shí)的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數量和實(shí)驗進(jìn)度。

（5）細胞離心的時(shí)候應避免離心力過(guò)小收集的細胞數量不夠，或離心力過(guò)大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時(shí)應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CLIAKitforCryBeta(HumancrystalproteinsBeta)ELISAKit人晶體蛋白β規格：48T/96T

RatEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 大鼠表皮生長(cháng)因子(EGF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

細胞腺苷酸激酶(Adenylatekinase)活性酶連續循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次

Ratdeoxypyridinoline,DPDELISAKit大鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規格：96T/48T

大鼠成纖維細胞生長(cháng)因子23(FGF23)ELISA試劑盒 ，英文名： FGF23 ELISA Kit

偏肺病毒(hMPV)檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )? 48T

HumaeceptorⅢfoheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRⅢELISA試劑盒人GFc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA試劑盒規格：96T/48T

ELISAKitFA小鼠規格：48T/96T

HumancicaicialPemphigoid,CPELISAKit人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

人強啡肽(Dyn)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人腺病毒3(ADV3)抗體(IgG)免疫試劑盒 Human ADV3 IgG ELISA Kit

二(MDA)測試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

RatMotilin,MTLELISA試劑盒大鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒規格：96T/48T

HumanHepatitisCvirusIgM,HCV-IgMELISA試劑盒人型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA試劑盒規格：96T/48T

HumanL-SelectinELISAKit人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒規格：96T/48T

腫瘤壞死因子配體超家族成員12A（CD266）抗體

骨形態(tài)發(fā)生蛋白11抗體

溶質(zhì)載體家族蛋白7成員2抗體

MOSC1蛋白抗體

?；摎涿钢墟溈贵w

白細胞F肌動(dòng)蛋白結合蛋白抗體

磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗體

CD5抗體

小鼠附睪脂肪干細胞（永生化）血小板白細胞C激酶底物同源結構域M2抗體