型 號(hào)
產(chǎn)品時(shí)間2023-11-12
所屬分類Mouse/小鼠Elisa試劑盒
報(bào)價(jià)1300
Mouse GR EliRsa Kit
本試劑僅供研究使用 標(biāo)本：血清或血漿及相關(guān)液體
性能:
1. 靈敏度：最小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
原理：
采用雙抗體夾心法測(cè)定MTHFD2水平。用純化的MTHFD2抗體包被微孔板，制成固相載體，實(shí)驗(yàn)時(shí)依次在微孔板中加入樣本及標(biāo)準(zhǔn)品，并加入 HRP 標(biāo)記的 ABP 抗體，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，反復(fù)洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色，再用硫酸終止反應(yīng)，轉(zhuǎn)變成黃色。顏色的深淺和樣品中的 ABP含量呈正相關(guān)。采用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度（OD 值），根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算測(cè)試樣品中 ABP 濃度。
試劑盒組成：
結(jié)果判斷與分析:
1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的待測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的待測(cè)物質(zhì)含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
ELISA試劑盒為什么要嚴(yán)格按照說明書操作？
一.先說最嚴(yán)重的操作錯(cuò)誤，看錯(cuò)或壓根不看試劑盒配套說明書，不按操作步驟加樣。比如把競(jìng)爭(zhēng)法的試劑盒當(dāng)作雙抗體夾心法來做，導(dǎo)致的結(jié)果就是整板顯示很強(qiáng)的藍(lán)色，無任何梯度。
二.混用別的試劑盒里的試劑。不同廠家或者相同廠家的不同試劑盒，所含的試劑成分很可能是不一樣的，混用導(dǎo)致的結(jié)果是，浪費(fèi)珍貴的樣本，樣品的回收率達(dá)不到預(yù)期值，如果混用不同試劑盒的酶復(fù)合物，會(huì)導(dǎo)致顯色過弱或過強(qiáng)，因?yàn)槊糠N試劑盒所用酶復(fù)合物效價(jià)可能不一樣。
三.不看文獻(xiàn)或者不做預(yù)實(shí)驗(yàn)。比如某個(gè)試劑盒按照其靈敏度范圍和文獻(xiàn)報(bào)道推算樣本應(yīng)該1:10稀釋，結(jié)果稀釋成1:1000，導(dǎo)致的結(jié)果是顯色過弱，結(jié)果不可用。
車.不校準(zhǔn)移液器及培養(yǎng)箱的溫度濕度。導(dǎo)致工作試劑濃度不準(zhǔn)確，孵育溫度不合適，實(shí)驗(yàn)帶來誤差。
五.洗滌不充分，每孔洗液加樣過少，或者殘留。導(dǎo)致的結(jié)果是顯色過快，同時(shí)背景較高。
六.手洗板時(shí)所用槍頭沒有懸空加入洗液，導(dǎo)致洗液污染，整個(gè)實(shí)驗(yàn)失敗。
七.剩余酶標(biāo)板條未及時(shí)放入干燥袋，導(dǎo)致酶標(biāo)板受潮，下一次再做時(shí)，顯色過弱或污染，CV值過高。
八.試劑盒保存條件不當(dāng)。試劑盒要求放4℃的，放在了-20℃?；蛘咭蠓?20℃的，放在了4℃。均會(huì)導(dǎo)致試劑盒敏感性下降。
以上只是最常見的操作錯(cuò)誤。順利完成一次ELISA實(shí)驗(yàn)需要注意的細(xì)節(jié)很多，許多操作環(huán)節(jié)都影響到檢測(cè)的質(zhì)量。
公司正在出售的產(chǎn)品：
氨基卞三磺酸（ANTS）熒光輔助糖蛋白電泳（FACE） | 熱休克蛋白70蛋白7抗體 |
細(xì)胞a-（a-AMYLASE）活性EPS-G7酶偶聯(lián)比色法定量檢測(cè)試劑盒 | 整合素α2（CD49b）重組兔單克隆抗體 |
10倍酵母菌SD-G培養(yǎng)基 | 干擾素-γ/IFN-γ抗體 |
細(xì)胞ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒 | 冰凍切片磷脂皮爾斯（Pearse）染色試劑盒 |
環(huán)境傷B（Salmonella Paratyphi B）定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒 | 細(xì)菌多聚糖PURPALD比色法定量檢測(cè)試劑盒 |
細(xì)胞總脂肪酶（lipase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 | 石蠟切片組織P21蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 |
動(dòng)物細(xì)胞P型ATP酶（P type ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 | 肌收縮蛋白MYOT抗體 |
細(xì)胞總抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量檢測(cè)試劑盒 | PSD95結(jié)合蛋白2抗體 |
糖果檸檬酸比色法定量檢測(cè)試劑盒 | 絲/蘇蛋白激酶SRPK7抗體 |
非同位素HRP－DAB顯色法DNA斑點(diǎn)雜交試劑盒 | FBXL15蛋白抗體 |
細(xì)胞SPHK激酶總活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C） | 磷脂特異性磷脂酶A1抗體 |
線粒體呼吸鏈復(fù)合物I（NADH－輔酶Q還原酶）活性定量檢測(cè)試劑盒 | KLHDC7B蛋白抗體 |
氧化酶蛋白5B抗體 | Mouse GR EliRsa Kitβ淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體 |
酪蛋白激酶1γ2/casein kinase Iγ1抗體 | BarX2蛋白抗體 |
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基4抗體 | 蛋白酶激活受體-1抗體 |
操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)
品組（6 個(gè)濃度）、空白孔、待測(cè)樣品組。
注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul
的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。
9. 讀板：在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。
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