收到NCI-H358人非小細胞肺癌細胞說(shuō)明書(shū)后的處理:
1)收到細胞后,首先觀(guān)察瓶身是否完好(注意有無(wú)縫隙,裂痕)。
2)顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)狀況,有無(wú)細胞漂浮。
3)用新潔爾滅消毒瓶口及瓶身。
4)打開(kāi)瓶口,再次用新潔爾滅消毒瓶口(可能會(huì )有液體溢出,注意不要碰到液體),酒精燈烤瓶口消毒。
5)將培養液轉移至50ml離心管或廣口瓶中(若細胞漂浮嚴重,離心培養基,1000g*5分鐘,將離心后的培養基轉移至另一個(gè)大離心管中,留一點(diǎn)吹打細胞沉淀成懸液,回收細胞至原培養瓶),若漂浮不嚴重,亦離心一下。
6)在原培養瓶中留一部分原裝培養液,再補加自己新配的培養基至適當容積,例如4ml,讓細胞適應一下環(huán)境。 當細胞長(cháng)到70-80%,凍存大部分,小部分傳代。
產(chǎn)品名稱(chēng):NCI-H358人非小細胞肺癌細胞說(shuō)明書(shū)
英文名稱(chēng):NCI-H358 cells in human non small cell lung cancer
培養基:RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
產(chǎn)品運輸:免費快遞
產(chǎn)品包裝:瓶裝
產(chǎn)品用途:細胞培養研究
操作說(shuō)明:
1)對于常溫運輸的細胞,收到細胞后,檢查是否有運輸問(wèn)題,即細胞培養瓶或管是否破損,細胞培養液是否溢出。若沒(méi)有運輸問(wèn)題,請75%酒精消毒后,保留封口膜,放入細胞培養箱中靜置。嚴格檢查培養箱的參數:溫度,濕度和CO2濃度。細胞靜置時(shí)間一般為6-12小時(shí)后,細胞狀態(tài)穩定后,即可開(kāi)始后續操作。選用正確的細胞培養體系,A2780(人卵巢癌細胞)嚴格按照說(shuō)明書(shū)的培養條件進(jìn)行培養。條件允許,培養的前三天內做細胞拍照記錄,通過(guò)郵件發(fā)送給我們做及時(shí)狀態(tài)跟蹤。
2)對于干冰運輸的細胞,請取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化,并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。然后將其復蘇培養,次日更換培養液。
?注意事項:
1)細胞漂?。号囵B瓶不開(kāi)封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。次日觀(guān)察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以離心去掉,留10ml培養液培養觀(guān)察,細胞生長(cháng)至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉到新培養瓶,原培養瓶加部分培養液繼續培養,中間注意觀(guān)察,我們的技術(shù)人員會(huì )一直跟蹤指導,直到問(wèn)題解決。
2)對于生長(cháng)緩慢的貼壁細胞:可采用適當的提高培養基中血清濃度,或隔日換液的方法來(lái)保證細胞的狀態(tài)和生長(cháng)速度。
3)對于生長(cháng)不均的貼壁細胞:在培養過(guò)程中若出現細胞分布明顯不均時(shí)(即某一區域細胞已重疊生長(cháng),而旁邊則為一塊空白),此時(shí)可將細胞進(jìn)行消化,重新打散,貼壁,加入新培養基進(jìn)行培養。
1-庚烷磺酸Sodium 1-heptanesulfonate
2-基-3-基-4-(2,2,2-三乙氧基)吡啶酸2-Chloromethyl-3-methyl-4-(2,2,2-trifluoroethoxy)pyridine hydrochloride
3,3'-硫代二丙酸3,3'-Thiodipropionic acid
2,5-2,5-Dichloroaniline
三異基亞磷酸酯Triisooctyl phosphite
N-芐基托品N-Benzyltropinone
L-纈氨酸芐酯對磺酸L-Valine benzyl ester 4-toluenesulfonate
N-溴代丁二酰亞胺(NBS)N-Bromosuccinimide
乙酰肼1-Acetyl-2-phenylhydrazine
1H-咪唑-4-1H-Imidazole-4-carbonitrile
漢黃芩苷BETA-D-GLUCOPYRANOSIDURONIC ACID
S-基-L-半胱氨酸S-Phenyl-L-cysteine
乙二醇丁2-Butoxyethanol
H-HIS(TRT)-2-CHLOROTRITYL RESINH-HIS(TRT)-2-CLTRT RESIN
乙利Ethephon
NCI-H358人非小細胞肺癌細胞說(shuō)明書(shū)MID1/Midline-1/RNF59 環(huán)指蛋白59抗體 * 0.2ml Hexythiazox solution
KF1/ZFP103 鋅指蛋白103抗體 * 0.2ml Imazalil solution
CNOT2 細胞表面趨因子受體4相關(guān)蛋白2抗體 * 0.2ml Siduron
phospho-CNOT2(Ser101) 磷細胞表面趨因子受體4相關(guān)蛋白2抗體 * 0.2ml Simazine
CNOT4 細胞表面趨因子受體4相關(guān)蛋白4抗體 * 0.2ml Simazine solution
CNOT6 細胞表面趨因子受體4相關(guān)蛋白6抗體 * 0.2ml Phoxim solution
LRSAM1 LRSAM1蛋白抗體 * 0.2ml Phoxim solution
CNOT8 細胞表面趨因子受體4相關(guān)蛋白8抗體 * 0.2ml Pirimicarb solution
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