注意事項:
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:口蹄疫病毒PCR檢測試劑盒哪家代理
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
口蹄疫病毒PCR檢測試劑盒哪家代理原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
N-基-D-天氡氨酸離子能谷氨酸受體2D(GRIN2D)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格:48T/96T forGlutamateReceptor,Ionotropic,N-Methyl-D-Aspartate2D(GRIN2D)
血管生成素4(ANGPT4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格:48T/96T forAngiopoietin4(ANGPT4)
白細(xì)胞激活黏附因子(ALCAM)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格:48T/96T forActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule(ALCAM)
原鈣黏素15(PCDH15)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格:48T/96T forProtocadherin15(PCDH15)
雌激素受體β(ERβ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格:48T/96T forEstrogenReceptorBeta(ERb)
天冬酰胺氨基葡萄糖酶(AGA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格:48T/96T forAspartylglucosaminidase(AGA)
腺苷酸環(huán)化酶5(ADCY5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格:48T/96T forAdenylateCyclase5(ADCY5)
前列腺素D2(PGD2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格:48T/96T forProstaglandinD2(PGD2)
類固醇5α還原酶1(SRD5α1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格:48T/96T forSteroid5AlphaReductase1(SRD5a1)
封閉蛋白19(CLDN19)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格:48T/96T forClaudin19(CLDN19)
心鈉肽(ANP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格:48T/96T
心鈉肽(ANP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格:48T/96T
心鈉肽(ANP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格:48T/96T
心鈉肽(ANP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格:48T/96T
心鈉肽(ANP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格:48T/96T
心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白C(MYBPC3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) * 規(guī)格:48T/96T
口蹄疫病毒PCR檢測試劑盒哪家代理Phospho-FoxO3a (Ser294) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白3AIgG 規(guī)格: 0.2ml *
Phospho-FoxO3a (Ser253) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白3AIgG 規(guī)格: 0.2ml *
FOXO4/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白4IgG 規(guī)格: 0.2ml *
Phospho-FoxO4 (Ser193) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白4IgG 規(guī)格: 0.2ml *
phospho-FOXO4 (phospho S197) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白4IgG 規(guī)格: 0.2ml *
phospho-FOXO4 (Ser262) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白4IgG 規(guī)格: 0.2ml *
FOXF1/FITC 熒光素標(biāo)記叉頭蛋白F1IgG 規(guī)格: 0.2ml *
FOXM1/HFH 11/FITC 熒光素標(biāo)記插頭蛋白M1IgG 規(guī)格: 0.2ml *
FoxP1/FITC 熒光素標(biāo)記FoxP1(T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子)IgG 規(guī)格: 0.2ml *
FoxP3/FITC 熒光素標(biāo)記叉頭蛋白3-T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子IgG 規(guī)格: 0.2ml *
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