參數規格:
產(chǎn)品名稱(chēng):人支原體PCR檢測試劑盒價(jià)格
英文名稱(chēng):Mycoplasma hominisPCR
產(chǎn)品規格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據保守區設計引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?人支原體PCR檢測試劑盒價(jià)格原理是由一對引物介導,能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實(shí)驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè )晒舛縋CR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實(shí)驗步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應,使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合,兩個(gè)引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長(cháng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
瓊脂糖蛋白A 英文名稱(chēng): Protein A-Sepharose 其他名稱(chēng): Protein A–Agarose 產(chǎn)品規格: BR 包裝: 250毫克/1克 級別:BRextent of labeling :~2 mg/ml
金屬硫蛋白 中文名稱(chēng): 金屬硫蛋白 英文名稱(chēng): MT 其他名稱(chēng): Metallothionein 產(chǎn)品規格: 混合體,95% 包裝: 10毫克 產(chǎn)品規格: I型,95%
肌紅蛋白 其他名稱(chēng): 肌球素;肌血球素;肌球蛋白 英文名稱(chēng): Myoglobin from equine skeletal muscle 其他名稱(chēng): Myoglobin from horse skeletal muscle 產(chǎn)品規格: BR,95-100% 包裝: 250毫克/1克CAS號:100684-32-0
瓊脂糖凝膠4B蛋白A 其他英文名稱(chēng): Protein A–Agarose 產(chǎn)品規格: BR 包裝: 1毫升 級別:BRextent of labeling :~6 mg/mlmatrix:Sepharose 4B Fast Flow
纖粘連蛋白 其他名稱(chēng): 纖連蛋白(人血);纖鏈蛋白;粘連蛋白;纖維結合素;血清纖維結合蛋白 英文名稱(chēng): Fibronectin from human plasma 其他名稱(chēng): CIG;Cold insoluble globulin 產(chǎn)品規格: 細胞培養級,95% 包裝: 1毫克/5毫克 CAS號:86088-83-7
β-乳球蛋白 英文名稱(chēng): β-Lactoglobulin from bovine milk 產(chǎn)品規格: BR,90% 包裝: 250毫克/1克CAS號:9045-23-2級別:BR含量 :≥90% (PAGE)
PUC18 產(chǎn)品規格: BR 包裝: 20微克 級別:BR濃度:450ug/ml性狀:液體或粉末。pUC18是適合于雙脫氧法DNA測序的載體,通常運用于重組dna的分子克隆中,首先我們制備大腸桿菌的感受態(tài)細胞(能接受外來(lái)重組的dna),這種感受態(tài)菌株必須不同外來(lái)DNA分子發(fā)生遺傳重組,通常是rec基因缺陷型的突變體,同時(shí)它們必須是限制系統缺陷或限制與修飾系統均缺陷的菌株,即具有具有這三種缺陷(rk mk rec ),同時(shí)對氨芐青霉素敏感(ap)。puc18載體自身帶有抗氨芐青霉素基因,而外源片段不具有,這樣只有帶有puc18的轉化子的菌株才能在氨芐青霉素平板上存活,而外源片段自身環(huán)化的不能存活,這稱(chēng)為抗性篩選。pUC18 上帶有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的調控序列和β-半乳糖苷酶N 端146 個(gè)氨基的編碼序列,在這個(gè)編碼區中插有一個(gè)多克隆位點(diǎn),且不影響正常功能,DH5α感受態(tài)菌株帶有β-半乳糖苷酶C 端部分序列的編碼信息,當puc18載體在正常情況下同感受態(tài)菌株融合后,互補表達具有酶活性的蛋白質(zhì),稱(chēng)為α-互補現象,當有外源片段插入多克隆位點(diǎn)后,互補現象消失,其形成的菌株顏色具有很大的差異,很容易鑒別,這種篩選方法稱(chēng)為α-互補現象篩選。由上可見(jiàn),puc18載體除了能重組導入外源片段外,在篩選表達過(guò)程中還具有重要的作用用途:生化研究??寺⊥庠椿?。利用lac promoter進(jìn)行基因表達。使用M13 primers進(jìn)行DNA測序。
PUC19 產(chǎn)品規格: BR 包裝: 20微克 濃度:350ug/ml性狀:液體或粉末。是一種常用克隆載體,由pBR322改造而來(lái),含有抗氨芐青霉素基因、Lac Z基因及與M13mp18相同的多克隆位點(diǎn)。PUC19與PUC18這兩個(gè)質(zhì)粒的結構幾乎是*一樣的,只是多克隆位點(diǎn)的排列方向相反。重組pUC18/19的克隆轉化細胞可用藍/白斑法篩選。宿主菌:建議用E.coli DH5α、JM109及XL1-Blue做受體菌用途:生化研究??寺?。插入DNA段的測序。制備DNA分子量標準。
人支原體PCR檢測試劑盒價(jià)格2-Bromo-4-iodoaniline 質(zhì)量規格:含量測定
Saikosaponin D 質(zhì)量規格:>98%,AMPK選擇性抑制劑
Meropenem 質(zhì)量規格:含量測定
D(-)-Fructose 質(zhì)量規格:含量測定
2,5-Dibromothiophene 質(zhì)量規格:含量測定
POLY(N-VINYLCARBAZOLE) 質(zhì)量規格:HPLC≥98%,標準品
5-Chlorosalicylaldehyde 質(zhì)量規格:檢查
(S)-(+)-NEOMENTHYLDIPHENYLPHOSPHINE 質(zhì)量規格:>98%,BR
注意事項:
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
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