參數規格：
產(chǎn)品名稱(chēng)：單核細胞增生李斯特菌PCR檢測試劑盒
英文名稱(chēng)：Listeria monocytogenesPCR
產(chǎn)品規格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據保守區設計引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?單核細胞增生李斯特菌PCR檢測試劑盒原理是由一對引物介導，能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實(shí)驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè )晒舛縋CR試劑盒結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實(shí)驗步驟:
典型的PCR由（1）高溫變性模板；（2）引物與模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反應組成一個(gè)循環(huán)，通過(guò)多次循環(huán)反應，使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是：
將待擴增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合，兩個(gè)引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長(cháng)短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入，以目的基因為模板從5’→3’方向延伸，合成DNA的新互補鏈。
芴甲氧羰基-S-乙酰氨甲基-L-半胱氨酸/Na-芴甲氧羰?；?S-(乙?；?氨甲基)-L-半胱氨酸/FMOC-S-乙酰氨甲基-L-半胱氨酸/Fmoc-Cys(Acm)-OH特純，98%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，86060-81-32～8°C

芴甲氧羰基-N-三苯甲基-L-組氨酸/N-Fmoc-N'-三苯甲基-L-組氨酸/Nα-FMOC-N(IM)-TRITYL-L-組氨酸/N-芴甲氧羰基-N'-三苯甲基-L-組氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-N'-三苯甲基-L-組氨酸/Fmoc-His(Trt)-OH特純，98%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，109425-51-62～8°C

芴甲氧羰?；?N-甲基-L-纈氨酸/Fmoc-N'-甲基-L-纈氨酸/Fmoc-N-Me-Val-OH特純，98%1克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，84000-11-32～8°C

芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-酪氨酸/Fmoc-O-叔丁基-L-酪氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-叔丁基-L-酪氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-O-叔丁基-L-酪氨酸/Fmoc-Tyr(tBu)-OH特純，98.5%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，71989-38-32～8°C

芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-蘇氨酸/Fmoc-O-叔丁基-L-蘇氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-叔丁基-L-蘇氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-O-叔丁基-L-蘇氨酸/Fmoc-Thr(tBu)-OH特純，98%1克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，71989-35-02～8°C

馬尿酰-組氨酰-亮氨酸/N-Hippuryl-His-Leu hydrateBR，98%25毫克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，207386-83-2保存：-20℃

O-乙酰-L-絲氨酸鹽酸鹽/O-乙酰-L-氫氯化絲氨酸/O-Acetyl-L-serine hydrochlorideBR，98%10毫克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，66638-22-0保存：-20℃

N,N'-二琥珀酰亞胺基碳酸酯/N,N'-琥珀酰亞胺基碳酸酯/N,N-琥珀酰氨基碳酸酯/N,N'-碳酸二琥珀酰亞胺基/N-氫氧化琥珀酰亞胺/DSC高純，98.5%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，74124-79-1RT

氨基酸螯合鐵/10% Iron chelate高純50克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，RT

DL-高半胱氨酸/DL-2-氨基-4-巰基丁酸/DL-類(lèi)半胱氨酸/DL-巰基丁氨酸/DL-同型半胱氨酸/同型半胱氨酸/升半胱胺酸/2-氨基-4-巰基丁酸/DL-HomocysteineBR，95%1克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，454-29-5保存：-20℃

Nα-FMOC-Nω-PBF-L-精氨酸/Fmoc-Pbf-精氨酸/N-芴甲氧羰?；?2,2,4,6,7-五甲基二氫苯并呋喃-5-磺酰-L-精氨酸/Fmoc-保護基精氨酸/芴甲氧羰酰-精氨酸/FMOC-NOMEGA-2,2,4,6,7-五甲基苯并呋喃-5-磺?；?L-精氨酸/Fmoc-Arg(Pbf)-OHBR，98%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，154445-77-9保存：-20℃

FMOC-L-谷氨酸5-叔丁酯/芴甲氧羰基-L-谷氨酸5-叔丁酯/芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-谷氨酸/Fmoc-O-叔丁基-L-谷氨酸/Fmoc-Glu(OtBu)-OHBR，98%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，71989-18-92～8°C

FMOC-S-叔丁基-L-半胱氨酸/FMOC-硫代叔丁基-半胱氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-S-叔丁基-L-半胱氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-硫代叔丁基-L-半胱氨酸/Fmoc-Cys(tBu)-OHBR，98%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，67436-13-92～8°C

甘氨酸叔丁酯鹽酸鹽/鹽酸甘氨酸叔丁酯/氨基乙酸叔四丁酯鹽酸鹽/甘氨酸叔丁基酯鹽酸鹽/Glycine tert butyl ester hydrochlorideBR，98%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，27532-96-3RT
單核細胞增生李斯特菌PCR檢測試劑盒SOB培養基粉劑，1LD-2-Aminobutyric acid 質(zhì)量規格：>99%,BR

SOB培養基(pH7.0)，500mlNA 質(zhì)量規格：>98%

SOC培養基粉劑，1LN-(tert-Butoxycarbonyl)-(S)-(+)-3-pyrrolidinol 質(zhì)量規格：HPLC≥98%，標準品

SOC培養基(pH7.0)，500mlAcetoacetanilide 質(zhì)量規格：>96%,BR

SB固體培養基粉劑(Super Broth)，1L5-[(1E)-2-(3,4-Dimethoxyphenyl)ethenyl]-1,3-benzenediol 質(zhì)量規格：HPLC≥98%，標準品

SOB固體培養基粉劑，1L2-Amino-4-cyanopyridine 質(zhì)量規格：>95%,BR，來(lái)源馬心

SOC固體培養基粉劑，1L5(6)-Aminofluorescein 質(zhì)量規格：>95%,BR，來(lái)源心

TB固體培養基粉劑(Terrific Broth)，1LN-(2-Hydroxyethyl)ethylenediaminetriacetic acid 質(zhì)量規格：>95%,BR，來(lái)源豬心
注意事項:
１．PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿(mǎn)意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?，從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。