購買(mǎi)感覺(jué)態(tài)細胞客戶(hù)請先與我司細胞銷(xiāo)售人員核實(shí)訂購的產(chǎn)品名稱(chēng)、種屬、貨號、數量、協(xié)商細胞價(jià)格并預約發(fā)貨期與提取方式。向銷(xiāo)售人員索取細胞說(shuō)明書(shū)并認真閱讀以方便你的實(shí)驗操作。產(chǎn)品僅用于科研

培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手撥EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì )降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過(guò)夜培養。如果進(jìn)行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時(shí)。

存

250mLAnticoagulant EDTA Solution（抗凝劑EDTA）Anticoagulant EDTA Solution常溫保存

250mLAntigen Retrieval Reagent，5XAntigen Retrieval Reagent，5X常溫保存

10gATP Solution（ATP溶液），100mMATP Solution，100mM常溫保存

100mLBES Buffer,0.5M,pH6.0 BES Buffer,0.5M,pH6.0 常溫保存

100mLBES Buffer,0.5M,pH6.5 BES Buffer,0.5M,pH6.5 常溫保存

100mLBES Buffer,0.5M,pH7.0  BES Buffer,0.5M,pH7.0  常溫保存

100mLBES Buffer,0.5M,pH7.4  BES Buffer,0.5M,pH7.4  常溫保存

500mLBES Buffered Saline,2X BES Buffered Saline,2X 常溫保存

50mLBeta Glycerophosphate Solution（beta-磷酸甘油溶液）,100mMBeta Glycerophosphate Solution,100mM常溫保存

250mLBeta-ME-EDTA Solution（beta-巰基乙醇-EDTA溶液） Beta-ME-EDTA Solution 常溫保存

250mLBicarbonate Buffer（碳酸氫鹽緩沖液），1M,pH8.5 Bicarbonate Buffer，1M,pH8.5 常溫保存

250mLBicarbonate Buffer（碳酸氫鹽緩沖液）,1M,pH9.0 Bicarbonate Buffer,1M,pH9.0 常溫保存

100mLBicine Buffer，0.5M,pH7.4  Bicine Buffer，0.5M,pH7.4  常溫保存

100mLBicine Buffer，0.5M,pH8.0  Bicine Buffer，0.5M,pH8.0  常溫保存

100mLBicine Buffer，0.5M,pH8.5  Bicine Buffer，0.5M,pH8.5  常溫保存

100mLBicine Buffer，0.5M,pH9.0  Bicine Buffer，0.5M,pH9.0  常溫保存

100mLBiotin Solution（生物素溶液）,0.02%Biotin Solution,0.02%常溫保存

100mLBis-Tris Buffer,0.2M,pH6.0  Bis-Tris Buffer,0.2M,pH6.0  常溫保存

100mLBis-Tris Buffer,0.2M,pH6.5  Bis-Tris Buffer,0.2M,pH6.5  常溫保存

100mLBis-Tris Buffer,0.2M,pH7.0  Bis-Tris Buffer,0.2M,pH7.0  常溫保存

100mLBis-Tris Buffer,0.2M,pH7.4  Bis-Tris Buffer,0.2M,pH7.4  常溫保存

黃曲霉PCR試劑盒

續斷苷B化學(xué)對照品HPLC≥95%20mg

感覺(jué)態(tài)細胞二氫大豆苷化學(xué)對照品HPLC≥95%20mg

氧化表小檗堿化學(xué)對照品HPLC≥95%20mg

寶藿苷V化學(xué)對照品HPLC≥98%20mg

寶藿苷VII化學(xué)對照品HPLC≥98%20mg

槐黃醇化學(xué)對照品HPLC≥98%20mg

鴉膽子素 D化學(xué)對照品HPLC≥98%20mg去氫紫堇堿化學(xué)對照品HPLC≥98%20mg

1,4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋(píng)果酸酯化學(xué)對照品HPLC≥98%20mg

丹參酮甲酯化學(xué)對照品HPLC≥98%20mg

20R-人參皂苷Rg2化學(xué)對照品HPLC≥98%20mg

三七素化學(xué)對照品HPLC≥98%20mg

齒孔酸; 齒孔菌酸化學(xué)對照品HPLC≥96.5%20mg

馬兜鈴內酰胺A化學(xué)對照品HPLC≥98%20mg

注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(cháng)，長(cháng)時(shí)間存放會(huì )降低轉化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應減少終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無(wú)菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
 5．根據實(shí)驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上，用無(wú)菌的涂布棒將細胞均勻涂開(kāi)，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時(shí)。