激光掃描共聚焦顯微鏡(laser scanning confocal microscope,LSCM)是80年代發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)具有劃時(shí)代意義的新產(chǎn)品。
實(shí)現(xiàn)了對(duì)細(xì)胞內(nèi)部非侵入式光學(xué)斷層掃描成像,從而對(duì)被檢物體樣品從停留到表面單層,靜態(tài)平面的觀察進(jìn)行到立體,斷層掃描、動(dòng)態(tài)全面的觀察,在生命科學(xué)研究中得到迅速應(yīng)用。
儀器構(gòu)成
(1)計(jì)算機(jī)系統(tǒng):控制著機(jī)械,光學(xué)、聲學(xué)系統(tǒng)及各種外圍設(shè)備。
(2)激光照射系統(tǒng):氬離子激光器和聲光調(diào)節(jié)器。
光信號(hào)接收和成像方式
(1)光信號(hào)接收 生物樣品發(fā)出的熒光通常有二種接收方式:
①由光電倍增管(PMT)把光信號(hào)轉(zhuǎn)變成電信號(hào);細(xì)胞
②利用電荷耦合器(CCD)把光信號(hào)轉(zhuǎn)變成電信號(hào)。
(2)成像方式
①載物臺(tái)運(yùn)動(dòng)成像:以直徑很小的激光束照射樣品,照射點(diǎn)發(fā)出的熒光信號(hào)經(jīng)PMT變成電信號(hào),然后載物臺(tái)移動(dòng)到下一點(diǎn),記錄該點(diǎn)的熒光強(qiáng)度。該方法無(wú)軸向像差,成像時(shí)間長(zhǎng);
②反射掃描成像方式,細(xì)胞通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)反射鏡使激光連續(xù)照射樣品,由CCD攝像機(jī)記錄下照射點(diǎn)所發(fā)射的熒光,成像速度快。
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