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    文氏巴爾通體探針?lè )晒舛縋CR試劑盒?反應五要素

    點(diǎn)擊次數:496  更新時(shí)間:2022-03-31

    文氏巴爾通體探針?lè )晒舛縋CR試劑盒反應五要素:


    參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+


    引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:


    ①引物長(cháng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。


    ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長(cháng)至10kb的片段。


    ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過(guò)多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。


    ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會(huì )形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。


    ⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數第二個(gè)堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。


    ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。


    ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無(wú)明顯同源性。


    引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會(huì )引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會(huì )。

    核突觸蛋白α抗體

    自噬相關(guān)蛋白4B抗體

    整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12抗體

    α-輔肌動(dòng)蛋白4(內參)抗體

    堿性磷酸酶抗體

    AU1 tag標簽抗體

    脂肪細胞增強結合蛋白1

    蛋白激酶B

    蛋白激酶B

    血管生成素樣蛋白2抗體

    血管生成素3/血管生成素4抗體

    膜粘連蛋白 I抗體

    膜粘連蛋白 Ⅱ抗體

    活化轉錄因子1抗體

    水通道蛋白4抗體

    活化復制因子2抗體

    腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體

    糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體

    血管緊張素Ⅱ抗體

    血管緊張素Ⅱ受體1抗體

    血管生成素-1抗體

    膜粘連蛋白5抗體

    重組膜粘連蛋白5抗體

    銜接蛋白α-Adaptin抗體

    凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)

    凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端)


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